1.荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。 2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 对于检测试剂和 DNA 标准品,每次使用前要先摇匀再离心数秒钟,使液体充 分沉降到管底。 4. 为保证定量结果的精确,请使用校准后的移液器操作。
1、 配制好的混合 BCA 工作液室温 24h 内稳定。 2、 加入 BCA 工作液后,也可以在室温放置 2h。BCA 法测定蛋白浓度时,吸光度会随着 时间的延长不断加深,且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高 温度孵育(如 60℃放置 30min)。
1、如 Buffer GL,Buffer W1 产生沉淀,可在 56℃水浴溶解; 2、 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 DNA 片段小,提取量下降; 3、 所有离心步骤均为台式离心机,室温下操作;
1、 样品避免反复冻融,否则会使蛋白变性或产生沉淀,导致提取的 DNA 片段小,提取量 下降。 2、 如 Buffer GB、Buffer RW1 结晶或产生沉淀,可在 56℃水浴溶解。 3、所有离心步骤均为室温下操作。
1. 去除基因组:根据以下表格配制反应体系,总体积为 10μl。为了保证反应液配制的准 确性,先按反应数+2 的量配制预混体系,然后再分装到每个反应管中,最后加入 RNA。10×gDNA Remover1 μlRNA 模板0.01~1μgDEPC-ddH2O补足至 10μl(注意:如果总 RNA 量大于 1 ug,请按比例扩大反应体系)将反应液轻轻搅拌均匀,短暂离心使管壁上的溶液收集到管底,室温或 25-37℃温育 5 分钟。 2. 反转录反应:在上述反应液中加入 4μl 5×cDNA RT Mix,6μl DEPC-ddH2O,轻轻混匀, 短暂离心;50℃孵育 5-15 分钟;85℃加热 3 分钟使酶失活;置于冰上进行后续实验或 冷冻保存。 注意:Real-time qPCR 时,作为模板直接稀释后添加(添加到 PCR 反应液中的反转录稀释液,尽 量不要超过 20%,以免导致 PCR 反应效率低下,无法准确定量)
应用领域:基因组学,蛋白质组学,细胞组学,免疫检测,代谢组学,生物制药研究与开发以及其他常用的高通量移液过程.