1. 本试剂仅用于体外诊断,不作其他用途。 2. 开始实验前,应仔细阅读此说明书。 3. 本试剂仅限有专业经验或经专业培训的人员使用。 4. 避免试剂接触眼睛和粘膜,如接触到敏感区域,立即用大量清水冲洗。
(注意:以下举例为常规qPCR 反应体系和反应程序,实际操作中应根据模板、引物结构和目的 片段大小不同进行相应的改进和优化) 1. 根据以下表格配置反应体系,总体积为20 μl试剂用量终浓度2 × Probe qPCR Mix10 μl1 ×正义引物 (10 μM)0.5 μl0.25 μM反义引物 (10 μM)0.5 μl0.25 μM探针(10 μM)0.5 μl0.25 μM模板 DNAx μlDEPC-ddH2OUp to 20 μl注意:1)通常引物浓度以 0.25 μM 可以得到较好结果,可以在 0.1 ~ 1.0 μM 作为设定范围的参考。 2)使用的探针浓度,与使用的荧光定量 PCR 仪、探针种类、荧光标记物质种类有关,实际使用时 请参照仪器说明书,或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。 3)通常 DNA 模板的量以 10-100 ng 基因组 DNA 或 1-10 ng cDNA 为参照,因不同物种的模板中含 有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。 2. qPCR 反应程序,两步法 PCR:过程温度时间预变性95℃5 min35 ~ 40cycles变性95℃15 sec退火/延伸60℃30 sec(注意:建议采用两步法 PCR 反应程序,若因使用 Tm 值较低的引物等原因,得不到良好的实验结 果时,可尝试进行三步法 PCR 扩增,退火温度请以 55℃ - 65℃的范围作为设定参考)
1、如Buffer GTL和Buffer GL产生沉淀,可在56℃水浴溶解;2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段小,提取量下降;3、 所有离心步骤均为台式离心机,室温下操作。
本产品供科学研究和生产使用,用于组织和细胞的体外培养。禁止临床使用。
1、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品, 不得存放于普通住宅内。 2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1. 1 ml 保存液内保存多块组织标本,依然能起到一定的保护作用,但细胞内会有残余的水分,保存期限要降低;若要长期保存,请尽快将每块组织分装到新的保存液中,或在管内直接按比例增加保存液的用量。2.浸泡时间过少,冷冻后细胞中残余的水分不会继续脱水;对于冷冻状态的组织,保存液无法起到保护作用。