(注意:以下举例为常规qPCR 反应体系和反应程序,实际操作中应根据模板、引物结构和目的 片段大小不同进行相应的改进和优化)1. 根据以下表格配置反应体系,总体积为20 μl试剂用量终浓度2 × Probe qPCR Master Mix10 μl1 ×正义引物 (10 μM)0.5 μl0.25 μM反义引物 (10 μM)0.5 μl0.25 μM探针(10 μM)0.5 μl0.25 μM50× ROX Reference Dye I or II0.4 μl1 ×模板DNAx μlDEPC-ddH2OUp to 20 μl注意:1)通常引物浓度以 0.25 μM 可以得到较好结果,可以在 0.1 ~ 1.0 μM 作为设定范围的参考。 2)使用的探针浓度,与使用的荧光定量 PCR 仪、探针种类、荧光标记物质种类有关,实际使用时 请参照仪器说明书,或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。 3)通常 DNA 模板的量以 10-100 ng 基因组 DNA 或 1-10 ng cDNA 为参照,因不同物种的模板中含 有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。需使用 ROX Reference Dye I 的机型:ABI Prism5700、7000、7300、7700、7900、7900HT、 7900HT Fast、Step-One、Step-One Plus。 需使用 ROX Reference Dye II 的机型:ABI Prism 7500/7500Fast、ViiA7, Stratagene MX4000/MX3005P/MX3000P。 不需要使用 ROX 的机型:Bio-Rad CFX96, CFX384, ...
本产品供科学研究和生产使用,用于组织和细胞的体外培养。禁止临床使用。
1、 环境温度较低时,可能会产生沉淀,可摇晃或通过 37℃水浴促溶。 2、 本产品对人体有刺激性,操作时请小心,适当防护。 3、 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品, 不得存放于普通住宅内。 4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1.本产品需要在无菌条件下使用。2. 将含有组织的保存液放入液氮中保存前,必须进行梯度降温,以免损伤组织。
(注意:以下举例为常规qPCR 反应体系和反应程序,实际操作中应根据模板、引物结构和目的 片段大小不同进行相应的改进和优化) 1. 将DNA模板、引物、2×SYBR qPCR Mix、50 × ROX Reference Dye I/II溶解并置于 冰上备用。 2. 根据以下表格配置反应体系,总体积为20 μl。试剂用量终浓度2 ×SYBR qPCR Mix10 μl1 ×正义引物 (10 μM)0.5 μl0.25 μM反义引物 (10 μM)0.5 μl0.25 μM模板DNAx μl50× ROX Reference Dye I or II0.4 μl1 ×ddH2OUp to 20 μl(注意:a.通常引物浓度以 0.25 μM 可以得到较好结果,可以终浓度 0.1-1.0 μM 作为设定范围的参 考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化 反应体系;b.通常 DNA 模板的量以 10-100 ng 基因组 DNA 或 1-10 ng cDNA 为参照,因不同物种的 模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。)需使用 ROX Reference Dye I 的机型:ABI Prism5700、7000、7300、7700、7900、7900HT、 7900HT Fast、Step-One、Step-One Plus。 需使用 ROX Reference Dye II 的机型: ABI Prism 7500/7500Fast 、 ViiA7, QuantStudio3/5/6Flex/7Flex, Stratagene MX4000/MX3005P/MX300...
本产品供科学研究和生产使用,用于组织和细胞的体外培养。