由于本产品的工作浓度是针对须添加血清的基础培养基而设定的,血清对抗生素有一 定的中和作用,实际发挥作用的抗生素浓度低于设定的工作浓度。当在无血清培养基中使 用时应适当减少用量,以免造成细胞毒性。
1. 含有去除基因组 DNA 酶,反转录产物中不含有基因组 DNA,下游定量实验更 精确; 2. 逆转录效率高,第一链 cDNA 产量高; 3. 最长可合成 5 kb 的 cDNA 片段; 4. 5×All-in-one cDNA 1st Strand Mix 包含除 RNA 模板以外的所有试剂,方便实验 人员使用; 5. 逆转录反应的模板总 RNA 范围可以在 10 ng ~ 5 ug 之间; 6. 适合于从各种组织中提取的总 RNA 或 mRNA 为模板合成 cDNA 第一链、实时 荧光定量 RT-qPCR、3’-和 5’-RACE 等。
1. 拿到样品后要尽快在 4 - 10%的福尔马林中固定,固定时间以 8 - 24 h 内为宜,时间过长 导致基因组断裂,影响下游实验;2. 确保包埋前的样品彻底脱水,残留的福尔马林会抑制 PCR 检测酶的作用; 3. 本产品适用于医学、科学实验研究; 4. 本产品所提 DNA 的完整性依赖于样本类型、储存时间以及固定条件,如果甲醛固定时 间过长或样本存放时间过久(>1 年)则易导致 DNA 完整性受损,无法扩出长片段; 5. 若 Buffer GA、GL、W1 中有沉淀,可在 37℃水浴中溶解,摇匀后使用。
1. 切胶:用干净刀片将目的 DNA 条带切下,尽量切除不含 DNA 的凝胶。 (注意:紫外线对 DNA 片段有损坏作用,切胶要迅速,避免长时间照射,同时做好眼睛及皮肤的防 护) 2. 称重:将切下的含有目的 DNA 条带的凝胶切成小块,放入 2 ml 塑料离心管中,称 重。 (注意:先称一个空的 2 ml 离心管的重量,放入凝胶块后再称一次,两次重量相减得到凝胶的重 量) 3. 溶胶:加入等体积 Buffer GN,60℃水浴,每隔 2-3 min 上下振荡,直到凝胶完全溶解。加入等体积的异丙醇混匀,再加入 10μl 磁珠混匀 5 分钟。 (注意:如凝胶重量为 100 mg,其体积可视为 100 μl,则加入 100 μl Buffer GN;如凝胶浓度大于 2%,所用溶胶液体积加倍) 4. 将离心管置于磁力架上静置 1 min,磁珠完全吸附后,吸去液体。 5. 将离心管从磁力架上取下,加 600 μl Buffer W2,旋涡充分混匀 30 s。(注意:Buffer W2 在使用前按要求加入无水乙醇,用后应立即盖紧瓶盖,以防乙醇挥发) 6. 将离心管置于磁力架上静置 1 min,磁珠完全吸附后,吸去液体。 7. 将离心管置于磁力架上,开盖室温放置 5-10min。 (注意:乙醇残留会抑制后续的酶反应,所以晾干时要确保乙醇挥发干净。但也不要干燥过度,以 免 DNA 难以洗脱)8. 将离心管从磁力架上取下,加入 30-50 μl Buffer EB,充分震荡 1-2 min。 9. 将离心管置于磁力架上静置 1 min,磁珠完全吸附后,小心将溶液转移至新的离心管 中,并于适当条件保存。 (注意:为增加洗脱效率,可将洗脱液在 60℃预热。如需使用去离子水洗脱...
本产品供科学研究和生产使用,用于组织和细胞的体外培养。禁止临床使用。
1、 本产品已高压灭菌,请在无菌环境下使用。 2、 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品, 不得存放于普通住宅内。 3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。