1、 环境温度较低时,10% SDS 溶液会产生大量白色沉淀,可通过 37℃水浴促溶。本产品 必须完全溶解后再使用。 3、 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药 品,不得存放于普通住宅内。 4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
关联产品产品编号产品名称GZ080101A-2.5病毒保存液(无色)GZ080101B-2.5病毒保存液(粉红色)GZ080102A-2.5非灭活型病毒保存液(无色)GZ080102B-2.5非灭活型病毒保存液(粉红色)GZ080103A-2.5灭活型胍盐类病毒保存液(无色)GZ080103B-2.5灭活型胍盐类病毒保存液(粉红色)GZ080104A-2.5灭活型核酸免提取病毒保存液(无色)GZ080104B-2.5灭活型核酸免提取病毒保存液(粉红色)GZ010701-50病毒基因组DNA提取试剂盒
一、DNA 释放液体样品1. 将约 2 μL 液体样品(如全血、细胞培养液、病毒样品、粪便样品)加入到 50 μL 核 酸释放剂中。(注意:总液体样品用量不要超过本产品用量的 1/10。) 2. 室温放置 3 分钟;对于较难裂解的样品(如有厚壁的真菌等),则保温时间可以延长 到 10-30 分钟。 3. 简短振荡混匀后取样品裂解液直接进行 PCR 扩增。 组织样品1. 将 2 mg 左右的固体样品(如动物组织、植物叶片、种子等)加入到 50 μL 核酸释放 剂中。 (注意:总样品量不要超过 1 mg/10 μL 的比例。) 2. 95℃加热 5 分钟;对于较难裂解的样品(如石蜡组织切片、血斑等),则保温时间可 以延长到 10-30 分钟。 3. 简短振荡混匀后取样品裂解液直接进行 PCR 扩增。 二、PCR 扩增 (注意:以下举例为常规PCR体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小 不同进行相应的调整和优化)1. PCR体系 推荐反应体系(20 μl)试剂用量样品裂解液Primer F (10 μM)0.5 μlPrimer R (10 μM)0.5 μl2×PCR MasterMix10 μlddH2OUp to 20 μl(注意:裂解液体积最好不要超过反应体积的1/10,对20μL的扩增体系,加入的裂解液不要超过2μL。引物浓度请以终浓度0.1 - 1.0 uM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系)2. PCR程序过程温度时间预变性94℃2 min25 ~ 35 cycles变性94℃30 sec退火55-65℃30 sec延伸72℃1kb/30 sec终延伸72℃2 min(注意:a 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 低...
本产品供科学研究和生产使用,用于组织和细胞的体外培养。禁止临床使用。
1、 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。 2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 3、 对于检测试剂和 DNA 标准品,每次使用前要先摇匀再离心数秒钟,使液体充 分沉降到管底。 4、 为保证定量结果的精确,请使用校准后的移液器操作。
(注意:试剂盒不具备独立的体外诊断作用,不可作为诊断试剂。 应严格控制病理组织的取样量, 建议用量为 5-10mg(一颗到半颗大米大小),取样量太多容易造成假阴性结果。)一、RNA 释放 1.组织类样本: 1.1 取少量样品(5-10 mg,一颗到半颗大米大小)于 1.5 ml 的离心管中,加入 100 μl 裂解液 B1,确保缓冲液可以完全覆盖样品。 1.2 用组织研磨器充分研磨。研磨结束后,加入 100 μl 裂解液 B2,震荡混匀,12,000 rpm 离心 2 min。 1.3 离心结束后,小心吸取 100 μl 上清液于另一干净的 1.5 ml 离心管中作为模板备用。 (注意:必须现处理现用。) 2. 血液类样本: 取 40 μl 血液加入到 100 μl 裂解液 B1 中,混匀后加入 100 μl 裂解液 B2,再涡旋混 匀,此混合液即可作为模板进行后续 qRT-PCR 检测。 注意:必须现处理现用。二、qRT-PCR 扩增 1. qRT-PCR 扩增反应 推荐反应体系(20 μl)试剂用量2ⅹOne-Step qRT-PCR Mix 10 μlRTase/Taq Mix1 μl直扩 qRT-PCR探针(10mM)0.5 μl直扩 qRT-PCR Primer F (10 μM)0.5 μl直扩 qRT-PCR Primer R (10 μM)0.5 μl模板2 μlddH2OUp to 20 μl试剂全部加好后,混匀后瞬时离心,将所有试剂收集到管底。 一般引物终浓度为 2 pmol/μl,探针终浓度为 4 pmol/μl。2. qRT-PCR反应条件:按下表进行qRT-PCR程序设置:过程温度时间反转录50℃1...