关联产品产品编号产品名称GZ30003MaxFect lipo 3000 Transfection ReagentGZ20003MaxFect lipo 2000 Transfection ReagentGZ10008PolyproFect Transfection ReagentGZ40008RNAiMaxFect Transfection ReagentGZ50010293MaxFect Transfection ReagentGZ70010VIRMaxFect Transfection ReagentGZ31985MaxFect 转染专用减血清培养基
1. 当天配制溶液当天使用完。若需要预先配制混合溶液,建议将配制好的溶液等份保存 在-20℃的密封小瓶中,2 周内使用。 2. 本说明书提供的 X-Gal 和 IPTG 的配比仅供参考,由于 X-Gal 和 IPTG 对不同载体的诱 导活性有差异,因此建议先进行预实验,选择最佳工作浓度再进行大规模培养。
(注意:以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化)1. PCR体系:推荐体系(50 μl)试剂用量模板DNA10 × Taq PCR Buffer5 μldNTP Mixture(2.5 mM each)4 μlPrimer 1 (10 μM)2 μlPrimer 2 (10 μM)2 μlTaq DNA Polymerase (2.5 U/μl)0.5 ~ 1 μlddH2OUp to 50 μl(注意:a引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。b镁离子浓度请以终浓度1.5-3mM作为设定范围的参考。可根据不同的引物对和模板来调节镁离子浓度,由此优化反应体系)2. PCR程序过程温度时间预变性94℃5 min25~35 cycles变性94℃30 sec退火55-65℃30 sec延伸72℃1kb/30 sec终延伸72℃5 min(注意:a一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。b延伸时间应根据所扩增片段大小设定,Taq DNA Polymerase的扩增效率为1 kb/30 sec。c可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以,在保证产物得率的前提下,应尽量减少循环次数)3. 结果检测:反应结束后取5 μl反应产物,加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳检测。
应用领域:基因组学,蛋白质组学,细胞组学,免疫检测,代谢组学,生物制药研究与开发以及其他常用的高通量移液过程.
1、细菌培养时间一般为 12-16 小时,如接种量大则应减少培养时间,过度培养会降低质 粒质量甚至导致质粒 DNA 突变; 2、 每次使用时都要注意 Buffer S2 和 S5 是否形成沉淀,如有沉淀 37℃溶解后再用; 3、 质粒的产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关。
1、如 Buffer GTL 和 Buffer GL 产生沉淀,可在 56℃水浴溶解; 2、 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 DNA 片段小,提取量下降; 3、所有离心步骤均为台式离心机,室温下操作。