1. 为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。建议可适当分装后使用。2. 需自备 PMSF。3. 所有接触样品的用具及试剂均需预冷。裂解蛋白的所有步骤都需在冰浴或 4℃进行。4. 可参考说明书或通过预实验来确定适合您实验条件的最佳裂解液。5. 提取蛋白后,如有必要,可透析除去表面活性剂。6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1. 工作液配制后请尽快使用。2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。3. 本产品在环境温度较低的情况下可能会有晶体析出,此为正常现象,可 37℃温育待其完全溶解之后再进行稀释配制工作液。4. 为取得更好的电泳效果,不建议重复使用。
1. 染色前的清洗步骤(第一步)中,水的质量非常重要,质量越好灵敏度越高,研究证明若用自来水加热清洗,染色效果与灵敏度仅与常规甲醇考马斯亮蓝染色(分子克隆第二版)相同。2. 脱色时可用自来水清洗。3. 若要得到无背景的染色胶,可重复脱色步骤或将胶放在水中过夜。4. 经本产品染色的 PAGE 胶,胶的缩涨度小于 5%,染色后的胶可在水中放置数月而无明显脱色。5. 每次加热后,继续在脱色摇床上摇动 5 分钟,可增强染色效果。6. 本染色液有轻微腐蚀性,请带手套操作。
1. 本产品中含少巯基乙醇。2. 本产品必须完全溶解后再使用。3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1. 为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。建议可适当分装后使用。2. 需自备 PMSF。3. 所有接触样品的用具及试剂均需预冷。裂解蛋白的所有步骤都需在冰浴或 4℃进行。4. 可参考说明书或通过预实验来确定适合您实验条件的最佳裂解液。5. 提取蛋白后,如有必要,可透析除去表面活性剂。6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
一、DNA 释放液体样品1. 将约 2 μL 液体样品(如全血、细胞培养液、病毒样品、粪便样品)加入到 50 μL 核 酸释放剂中。(注意:总液体样品用量不要超过本产品用量的 1/10。) 2. 室温放置 3 分钟;对于较难裂解的样品(如有厚壁的真菌等),则保温时间可以延长 到 10-30 分钟。 3. 简短振荡混匀后取样品裂解液直接进行 PCR 扩增。 组织样品1. 将 2 mg 左右的固体样品(如动物组织、植物叶片、种子等)加入到 50 μL 核酸释放 剂中。 (注意:总样品量不要超过 1 mg/10 μL 的比例。) 2. 95℃加热 5 分钟;对于较难裂解的样品(如石蜡组织切片、血斑等),则保温时间可 以延长到 10-30 分钟。 3. 简短振荡混匀后取样品裂解液直接进行 PCR 扩增。 二、PCR 扩增 (注意:以下举例为常规PCR体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小 不同进行相应的调整和优化)1. PCR体系 推荐反应体系(20 μl)试剂用量样品裂解液Primer F (10 μM)0.5 μlPrimer R (10 μM)0.5 μl2×PCR MasterMix10 μlddH2OUp to 20 μl(注意:裂解液体积最好不要超过反应体积的1/10,对20μL的扩增体系,加入的裂解液不要超过2μL。引物浓度请以终浓度0.1 - 1.0 uM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系)2. PCR程序过程温度时间预变性94℃2 min25 ~ 35 cycles变性94℃30 sec退火55-65℃30 sec延伸72℃1kb/30 sec终延伸72℃2 min(注意:a 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 低...