1. 本试剂仅用于体外诊断，不作其他用途。 2. 开始实验前，应仔细阅读此说明书。 3. 本试剂仅限有专业经验或经专业培训的人员使用。 4. 避免试剂接触眼睛和粘膜，如接触到敏感区域，立即用大量清水冲洗。
一、DNA 提取(样本制备区) 用自选方法提取纯化样品 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。建议使用高效植物基因组 DNA 提取试剂盒（Cat: GZ011102-50）提取 DNA。 二、试剂配制(试剂准备区) 若有 N 个待检样品，准备 N+2 个 PCR 管(N 个待检样品+1 个阴性对照+1 个阳性对 照)，向各 PCR 管中分别加入下列成分。成分N个待检样品管PCR阴性对照PCR阳性对照2×Taq PCR Master Mix各10 μL10 μL10 μL转基因品系玉米MON88017 PCR引物混合液各1 μL1 μL1 μLddH2O7 μL7 μL7 μL转移至样本准备区。三、添加模板(模板添加区)向PCR管中分别加入2ul模板，顺序为阴性对照（ddH2O）、待测样品模板、转基因品系玉米MON88017 PCR阳性对照，离心30秒，立即进行扩增反应。四、扩增反应(扩增及产物分析区)将PCR管放置在PCR扩增仪器样品槽相应位置，进行扩增，扩增程序如下：过程温度时间预变性95℃3 minPCR反应（35个循环）95℃20 sec58℃20 sec72℃15 sec最后延伸72℃5 min五、电泳检测 取 5-10 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 2×Taq PCR Master Mix 含 染料，在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。 阳性对照结果：有 129bp 条带。 阴性对照结果：无 129bp 条带。 样本检测结果：有 129bp 条带，表明该样本是转基因品系玉米 MON88017，结果为 阳性；无 129bp 条带，该样本不是转基因品系玉米 MON88017，结果为阴性...
一、DNA 提取(样本制备区) 用自选方法提取纯化样品 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。 建议使用高效植物基因组 DNA 提取试剂盒（Cat: GZ011102-50）提取 DNA。二、试剂配制(试剂准备区) 若有 N 个待检样品，准备 N+2 个 PCR 管(N 个待检样品+1 个阴性对照+1 个阳性对 照)，向各 PCR 管中分别加入下列成分。成分N个待检样品管PCR阴性对照PCR阳性对照2×Taq PCR Master Mix各10 μL10 μL10 μL转基因品系玉米MON863 PCR引物混合液各1 μL1 μL1 μLddH2O7 μL7 μL7 μL转移至样本准备区。三、添加模板(模板添加区)向PCR管中分别加入2ul模板，顺序为阴性对照（ddH2O）、待测样品模板、转基因品系玉米MON863 PCR阳性对照，离心30秒，立即进行扩增反应。四、扩增反应(扩增及产物分析区)将PCR管放置在PCR扩增仪器样品槽相应位置，进行扩增，扩增程序如下：过程温度时间预变性95℃3 minPCR反应（35个循环）95℃20 sec58℃20 sec72℃15 sec最后延伸72℃5 min五、电泳检测取 5-10 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 2×Taq PCR Master Mix 含 染料，在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。 阳性对照结果：有 411bp 条带。 阴性对照结果：无 411bp 条带。 样本检测结果：有 411bp 条带，表明该样本是转基因品系玉米 MON863，结果为阳 性；无 411bp 条带，该样本不是转基因品系玉米 MON863，结果为阴性。
一、DNA 提取(样本制备区)用自选方法提取纯化样品 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。 建议使用高效植物基因组 DNA 提取试剂盒（Cat: GZ011102-50）提取 DNA。二、试剂配制(试剂准备区)若有 N 个待检样品，准备 N+2 个 PCR 管(N 个待检样品+1 个阴性对照+1 个阳性对 照)，向各 PCR 管中分别加入下列成分。成分N个待检样品管PCR阴性对照PCR阳性对照2×Taq PCR Master Mix各10 μL10 μL10 μL转基因品系玉米GA21 PCR引物混合液各1 μL1 μL1 μLddH2O7 μL7 μL7 μL转移至样本准备区。 三、添加模板(模板添加区) 向 PCR 管中分别加入 2ul 模板，顺序为阴性对照（ddH2O）、待测样品模板、转基 因品系玉米 GA21 PCR 阳性对照，离心 30 秒，立即进行扩增反应。 四、扩增反应(扩增及产物分析区) 将 PCR 管放置在 PCR 扩增仪器样品槽相应位置，进行扩增，扩增程序如下：过程温度时间预变性95℃3 minPCR反应（35个循环）95℃20 sec58℃20 sec72℃15 sec最后延伸72℃5 min五、电泳检测取 5-10 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 2×Taq PCR Master Mix 含 染料，在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。 阳性对照结果：有 270bp 条带。阴性对照结果：无 270bp 条带。 样本检测结果：有 270bp 条带，表明该样本是转基因品系玉米 GA21，结果为阳 性；无 270bp 条带，该样本不是转基因品系玉米 GA21，结果为阴性。
（注意：以下举例为常规PCR体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小 不同进行相应的调整和优化） 1. PCR体系 推荐反应体系（20 μl）试剂用量模板DNAPrimer 1 (10 μM)0.5 μlPrimer 2 (10 μM)0.5 μl2×Taq PCR MasterMix（无甘油）10 μlddH2OUp to 20 μl（注意：引物浓度请以终浓度 0.1 - 1.0 uM 作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系）2. PCR 程序过程温度时间预变性94℃2 min25 ~ 35 cycles变性94℃30 sec退火55-65℃30 sec延伸72℃1kb/30 sec终延伸72℃2 min（注意：a 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 低 5℃，无法得到理想的扩增效率时，适 当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。b 延伸时间应根据所扩 增片段大小设定，Taq DNA Polymerase 的扩增效率为 1 kb/30 sec。c 可根据扩增产物的下游应用设定 循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。 所以，在保证产物得率的前提下，应尽量减少循环次数）3. 结果检测：反应结束后取5 μl反应产物，加入适量上样缓冲液，然后进行琼脂糖凝 胶电泳检测。
1. 细菌培养时间一般为 12-16 小时，如接种量大则应减少培养时间，过度培养会降低质 粒质量甚至导致质粒 DNA 突变； 2. 每次使用时都要注意 Buffer S2 和 S3 是否形成沉淀，如有沉淀 37℃溶解后再用； 3. 质粒的产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关。