DNA 转染优化方案 为达到高转染效率和低细胞毒性的最佳效果，可以对 DNA 和转染试剂的比例及转染 初始细胞密度进行优化。比如要确保细胞在转染时汇合度大于 90%，DNA (μg): PolyproFect 试剂 (μl) 的比值在 1:1 到 1:4 范围内。 扩大或减小转染规模 在不同培养容器中，转染时培养基、DNA/RNA 和 PolyproFect 用量，请参考下表。 对于自动化，高通量转染，建议在 96 孔板中加入 50µl 复合物。注意：如果想将细胞直接 加入到转染复合物中来进行快速 96 孔板转染。在板中制备复合物，直接加入两倍于通用 实验方案所建议的细胞数量，总体积仍为 100ul。在复合物存在的情况下，细胞仍可贴壁。培养容器培养表面积 (cm2)培养基体积稀释培养基体积DNA 转染 DNAPolyproFect 试剂96孔板0.3100 µl2 × 25 µl0.2 µg0.5 µl24孔板2500 µl2 × 50 µl0.8 µg2.0 µl12孔板41 ml2 × 100 µl1.6 µg4.0 µl6孔板102 ml2 × 250 µl4.0 µg10 µl6cm培养皿205 ml2 × 500 µl8.0 µg20 µl10cm培养皿6010 ml2 × 1.5 ml24 µg60 µl
1、TAE 和 TBE 导电性能存在差异，如需缩短电泳时间，可选用 TAE 电泳缓冲液。 2、染料无需低温冷藏，请于室温下储存，以避免沉淀，若发现沉淀，请将染料加热至 45- 50℃，2 min，振荡溶解，不影响使用效果。 3、本产品可以用来染色单链 DNA 和 RNA，但它对单链 DNA 或 RNA 的灵敏度低于双链 DNA。
1、实践证明，浓缩胶的凝固时间与温度成正相关。同等条件下，温度越高，凝固速度越 快。 2、过硫酸铵替代物溶液的使用量仅作参考，实际用量可根据个人实验习惯和经验增加或 减少。加入较多量的过硫酸铵替代物可加快凝胶速度，反之亦然。 3、本产品仅限于专业人员的科学研究用，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性 手套和口罩操作。
1、细菌培养时间一般为 12 ~ 16 小时，如接种量大则应减少培养时间，过度培养会降低质 粒质量甚至导致质粒 DNA 突变； 2、每次使用时都要注意 Buffer S2 和 S3 是否形成沉淀，如有沉淀 37℃溶解后再用； 3、注意 Buffer S1，S2 和 S3 的用量比例，若细菌量增大，需按比例放大这些溶液的使用量； 4、质粒的产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关，一般 1.5 ml 过夜培养菌体可收获约 10 ug 高拷贝质粒。
本产品供科学研究和生产使用，用于组织和细胞的体外培养。禁止临床使用。
1. 本试剂仅用于体外诊断，不作其他用途。 2. 开始实验前，应仔细阅读此说明书。 3. 本试剂仅限有专业经验或经专业培训的人员使用。 4. 避免试剂接触眼睛和粘膜，如接触到敏感区域，立即用大量清水冲洗。