结果分析 1. 如果制作标准曲线,则以阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制 标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的 log 值,推算出 其浓度。 2. 如果未制作标准曲线,按照如下标准判定结果: 阳性对照(1×10E5 拷贝/μL)结果:Ct 值 阴性对照结果:Ct 值35 或无 Ct 值,无明显指数增长期和平台期。 样本检测结果:Ct 值35 或无 Ct 值,表明样本中未检测出核桃源性成分,结果为阴性;Ct 值在 33-35 范围,应对样本进行复检,如重复实验结果 Ct 值仍在 33-35 范围,熔解曲线 的峰值与阳性对照相同,则该样本判断为阳性;若不相同,熔解 Tm 值与目的扩增片段 Tm 值相差≥2℃,则为非特异性扩增,该样本判断为阴性。
注意:尽管本产品含有病毒灭活剂,但不能排除离心管外在取样时污染了病毒,因此操作人员必须按处理传染性样品的方法进行相应的防护,必须在合乎国家规定的实验室进行所有操作。本产品具有抑菌性,但不能排除分装到采样管中时不被污染,分装前后建议进行适当的灭菌处理。1. 先将本产品稀释 10 倍,得到 1×保存液。如若需要 10L 的病毒保存液,取 1L 本产品,加入 9L 超纯水充分搅拌混匀即可。2. 稀释好的 1×保存液进行分装,管内装量:3ml(一拖一),6ml(一拖五,一拖十)。3. 采样前,在含有病毒保存液的采样管的标签上标注相关样品信息。4. 根据不同的采样要求,用采样拭子在相应的部位和器官采样。具体采样方法如下: a) 鼻拭子:将拭子头轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。 b) 咽拭子:用拭子擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁后退出。 c) 尿道采样:对男性,用拭子插入尿道约 2cm 处旋转,静止数秒后退出。对女性,抹去宫颈口粘液,用拭子插入宫颈管 1-2cm 处后退出。 d) 其他拭子采样:本手册暂不详述。5. 迅速将拭子放入含有病毒保存液的采样管中,将拭子在样品管中旋转 15 秒。6. 将采样拭子在折断处折断,丢弃把柄端,旋紧管盖。7. 新鲜采集的标本应在 4℃-25℃下 96 小时(4 天)内运送至实验室,未能 96 小时送至实验室的,应置于-70℃或以下保存,DNA 样品也可以放-20℃保存。
1. 本试剂仅用于体外诊断,不作其他用途。 2. 开始实验前,应仔细阅读此说明书。 3. 本试剂仅限有专业经验或经专业培训的人员使用。 4. 避免试剂接触眼睛和粘膜,如接触到敏感区域,立即用大量清水冲洗。
关联产品产品编号产品名称GZ10008PolyproFect Transfection ReagentGZ20003MaxFect lipo 2000 Transfection ReagentGZ40008RNAiMaxFect Transfection ReagentGZ50010293MaxFect Transfection ReagentGZ60010CHOMaxFect Transfection ReagentGZ70010VIRMaxFect Transfection ReagentGZ31985MaxFect 转染专用减血清培养基
(注意:以下举例为常规PCR体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小 不同进行相应的调整和优化) 1. PCR体系 推荐反应体系(20 μl)试剂用量模板 DNAPrimer 1 (10 μM)0.5 μlPrimer 2 (10 μM)0.5 μl2×Pfu PCR MasterMix10 μlddH2OUp to 20 μl(注意:引物浓度请以终浓度 0.1 - 1.0 μM 作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引 物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系) 2. PCR 程序过程温度时间预变性94℃2 min变性94℃30 sec25 ~ 35cycles 退火55 ~ 65℃30 sec延伸72℃60 sec/kb最后延伸72℃5 min(注意:a 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 低 5℃,无法得到理想的扩增效率 时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。b 延伸时间应 根据所扩增片段大小设定,Pfu DNA Polymerase 的扩增效率为1 kb/min。c 可根据扩增产物的下游 应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异 性背景严重。所以,在保证产物得率的前提下,应尽量减少循环次数) 3. 结果检测:反应结束后取5 μl反应产物,加入适量上样缓冲液(含染料的不用加), 然后进行琼脂糖凝胶电泳检测。
应用领域:基因组学,蛋白质组学,细胞组学,免疫检测,代谢组学,生物制药研究与开发以及其他常用的高通量移液过程.