一、DNA 释放
液体样品
1. 将约 2 μL 液体样品（如全血、细胞培养液、病毒样品、粪便样品）加入到 50 μL 核 酸释放剂中。
（注意：总液体样品用量不要超过本产品用量的 1/10。）
2. 室温放置 3 分钟；对于较难裂解的样品（如有厚壁的真菌等），则保温时间可以延长 到 10-30 分钟。
3. 简短振荡混匀后取样品裂解液直接进行 PCR 扩增。
组织样品
1. 将 2 mg 左右的固体样品（如动物组织、植物叶片、种子等）加入到 50 μL 核酸释放 剂中。
（注意：总样品量不要超过 1 mg/10 μL 的比例。）
2. 95℃加热 5 分钟；对于较难裂解的样品（如石蜡组织切片、血斑等），则保温时间可 以延长到 10-30 分钟。
3. 简短振荡混匀后取样品裂解液直接进行 PCR 扩增。
二、PCR 扩增
（注意：以下举例为常规PCR体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小 不同进行相应的调整和优化）
1. PCR体系 推荐反应体系（20 μl）
试剂 | 用量 |
样品裂解液 | < 2 μl |
Primer F (10 μM) | 0.5 μl |
Primer R (10 μM) | 0.5 μl |
2×PCR MasterMix | 10 μl |
ddH2O | Up to 20 μl |
（注意：裂解液体积最好不要超过反应体积的1/10，对20μL的扩增体系，加入的裂解液不要超过2μL。引物浓度请以终浓度0.1 - 1.0 uM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系）
2. PCR程序
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 94℃ | 2 min |
25 ~ 35 cycles | 变性 | 94℃ | 30 sec |
退火 | 55-65℃ | 30 sec |
延伸 | 72℃ | 1kb/30 sec |
终延伸 | 72℃ | 2 min |
（注意：a 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 低 5℃，无法得到理想的扩增效率时，适 当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。b 延伸时间应根据所扩 增片段大小设定，Taq DNA Polymerase 的扩增效率为 1 kb/30 sec。c 可根据扩增产物的下游应用设定 循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。 所以，在保证产物得率的前提下，应尽量减少循环次数）
3. 结果检测：反应结束后取5 μl反应产物，进行琼脂糖凝胶电泳检测。