1、 RNA 最重要的指标就是没有降解完整性高,目前普通的分光光度计包括 Nanodrop 等是无法 通过测量 OD260/280 和 OD260/230 来确认 RNA 是否降解的。判断 RNA 是否降解可以通过 跑 1%琼脂糖电泳检测,通过直接观察 28S:18S 比值来判断是否降解,或者用采用安捷伦 Bioanalyzer2100 仪器检测,测定 RNA 产物的 RIN 值。
2、 Trizol 的适用范围很广。绝大部分常规动物组织细胞(如:肝脏、肾脏、脑组织、培养细胞)、 简单植物组织(如水稻、玉米、拟南芥、烟草、小麦等)都有良好效果。但是对于多糖多酚植 物如棉花,某些难破壁的细菌等样品不适用。
3、 在匀化后和加入氯仿之前,样品可以在–60~–70°C 保存至少一个月。RNA 沉淀(步骤 6, RNA 漂洗)溶于 75%的乙醇在 2~8°C 至少可以保存一周,在–5~–20°C 下至可保存一年。