一、DNA 提取(样本制备区)用自选方法提取纯化样品 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。 建议使用高效植物基因组 DNA 提取试剂盒（Cat: GZ011102-50）提取 DNA。二、试剂配制(试剂准备区)若有 N 个待检样品，准备 N+2 个 PCR 管(N 个待检样品+1 个阴性对照+1 个阳性对 照)，向各 PCR 管中分别加入下列成分。成分N个待检样品管PCR阴性对照PCR阳性对照2×Taq PCR Master Mix各10 μL10 μL10 μL转基因品系玉米GA21 PCR引物混合液各1 μL1 μL1 μLddH2O7 μL7 μL7 μL转移至样本准备区。 三、添加模板(模板添加区) 向 PCR 管中分别加入 2ul 模板，顺序为阴性对照（ddH2O）、待测样品模板、转基 因品系玉米 GA21 PCR 阳性对照，离心 30 秒，立即进行扩增反应。 四、扩增反应(扩增及产物分析区) 将 PCR 管放置在 PCR 扩增仪器样品槽相应位置，进行扩增，扩增程序如下：过程温度时间预变性95℃3 minPCR反应（35个循环）95℃20 sec58℃20 sec72℃15 sec最后延伸72℃5 min五、电泳检测取 5-10 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 2×Taq PCR Master Mix 含 染料，在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。 阳性对照结果：有 270bp 条带。阴性对照结果：无 270bp 条带。 样本检测结果：有 270bp 条带，表明该样本是转基因品系玉米 GA21，结果为阳 性；无 270bp 条带，该样本不是转基因品系玉米 GA21，结果为阴性。
一、 稀释标准曲线样品（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）。 由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能 污染样品或本试剂盒的其他成分。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不 提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的 DNA 片段作为阳性对照。1. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。3. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。4. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震 荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。5. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震 荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。 二、 样品 DNA 的制备7. 如果有 N 个样品待提取，最好设置 N+2 个提取，多出的是 PC（样品制备阳性对 照）和 NC（样品制备阴性对照）。可以取阳性对照的 10000 倍稀释液 10μL 再加 上一定量的水，使总体积与待提取样品的规定体积一致，以此作为 PC。另外用水作 为 NC。8. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数 DNA 提取试剂盒兼容。三、 Probe qPCR 反应（20μL 体系，在样品制备室进行）9. 如果做定量分析并且只做...